血清/血漿microRNA 熒光定量PCR檢測

　　實(shí)驗介紹全血是將體內血液采集到血管中所形成的混合物。

 

　　血漿是抗凝全血經(jīng)離心分離得到的淡黃色透明液體。

 

　　血漿是血液是液體成分，血細胞懸浮于其中。血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白、葡萄糖、無(wú)機鹽離子、激素以及二氧化碳等。

 

　　血清是血漿凝固后析出的淡黃色透明液體。血清與血漿的區別是：血清中不含纖維蛋白等凝血因子。

 

　　我們通過(guò)不斷改進(jìn)與摸索建立了一個(gè)比較成熟的血液microRNA實(shí)驗體系，包括提取、RNA的嚴格質(zhì)控、定量，可以為研究人員提供可靠的microRNA定量檢測實(shí)驗技術(shù)服務(wù)。

 

　　質(zhì)量控制：引入外參RNA（Spike-in RNA）、同時(shí)進(jìn)行特定的microRNA檢測進(jìn)行樣本質(zhì)控

 

　　交付結果：實(shí)驗報告、樣本返還

 

　　質(zhì)量保證：客觀(guān)、公正、可信數據結果

 

　　交付時(shí)間：大約5-10個(gè)工作日（根據預實(shí)驗、樣本數量情況決定）

 

　　服務(wù)項目

 

　　服務(wù)流程1、 依據客戶(hù)提供的基因ID或基因名稱(chēng)設計合成引物（含驗證）

 

　　2、 標準品制備:只針對于絕對定量，相對定量多種內參可供選擇（如：U6，miR16等）

 

　　3、 RNA提取及RNA質(zhì)量分析：采用Invitrogen的TRIzol 進(jìn)行裂解提取，RNA提取質(zhì)量有瓊脂糖凝膠電泳及分光光度計雙重質(zhì)控

 

　　4、 逆轉錄：嚴格按照f(shuō)ermentas的反轉錄試劑盒要求抽取質(zhì)控合格的RNA，并且使用基因特異性引物進(jìn)行反轉錄，以最大程度的確保反轉錄酶的反轉效率

 

　　5、 預實(shí)驗驗證樣品和引物：依據客戶(hù)選定內參及基因，對客戶(hù)全部樣本內參及個(gè)別樣本基因進(jìn)行驗證，以確保樣本的反轉錄情況及基因的設計

 

　　6、 正式實(shí)驗：在以上所有質(zhì)控合格的情況下，每個(gè)樣本每個(gè)基因進(jìn)行四個(gè)復孔的重復檢測，確保至少提供三個(gè)復孔Ct≤0.5的數據

 

　　7、 實(shí)驗報告：提供詳細的實(shí)驗報告，包括RNA提取電泳圖、擴增曲線(xiàn)、溶解曲線(xiàn)及數據結果分析

 

　　樣本要求500μl以上保存合適的液體樣本、分離血清/血漿樣本的全血不可冷凍，4℃運輸，短期保存，盡快提取，混入的血細胞盡量棄盡，分離后的血清樣本-80℃保存，避免反復凍融

 

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