脂質(zhì)體轉染

　　實(shí)驗介紹脂質(zhì)體轉染用于將DNA、RNA等導入動(dòng)物細胞中，做基因功能或基因表達調控研究等。

 

　　我公司脂質(zhì)體轉染一般選用Invitrogen 公司的Lipofectamine? 2000作為轉染試劑。Lipofectamine? 2000轉染試劑是一種陽(yáng)離子脂質(zhì)體，在體外可以轉染許多種哺乳動(dòng)物細胞，對多種細胞系都可提供較高的轉染效率，具有高效性和操作步驟簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。其原理是:是帶負電的DNA/RNA自動(dòng)結合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經(jīng)過(guò)內吞被導入細胞。不同細胞Lipofectamine? 2000轉染效率有一定差異，因此脂質(zhì)體轉染前需要對具體細胞摸索適宜的轉染條件。

 

　　服務(wù)項目

 

　　服務(wù)流程1、細胞培養。

 

　　2、傳板并用熒光質(zhì)?；驘晒鈱φ誱imics進(jìn)行轉染預實(shí)驗。

 

　　3、檢測熒光強度，確定最適轉染條件。

 

　　4、根據最適轉染條件進(jìn)行轉染正式實(shí)驗。

 

　　最終提供：實(shí)驗報告（包括儀器、實(shí)驗所需試劑耗材、詳細實(shí)驗步驟等）、轉染后的細胞、熒光圖

 

　　樣本要求1、客戶(hù)提供生長(cháng)狀況良好的細胞株，同時(shí)提供細胞特性，培養條件及相關(guān)注意事項。

 

　　2、本公司常備DMEM/F-12 1:1、DMEM(H)和RPMI-1640培養基，如細胞需要用其它培養基，則需要客戶(hù)提供培養基。

 

　　3、需要提供待轉染的無(wú)內毒素質(zhì)?；騧icRNA mimics，質(zhì)粒濃度大于400ng/uL，mimics濃度不低于20uM，同時(shí)需提供質(zhì)粒的背景信息(質(zhì)粒名稱(chēng)，是否帶有熒光標簽等)。

 

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