細胞增殖與毒性檢測（MTT/CCK8檢測）

　　實(shí)驗介紹本公司細胞增殖與毒性使用CCK8檢測，Cell Counting Kit-8簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

 

　　WST-8是一種類(lèi)似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線(xiàn)粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線(xiàn)性關(guān)系。顏色深淺可以通過(guò)450nm處吸光度值表示。

 

　　MTT/CCK8是通過(guò)快速簡(jiǎn)便的顏色反應來(lái)檢測細胞存活數量。

 

　　MTT/CCK8可作為哺乳類(lèi)動(dòng)物細胞線(xiàn)粒體中琥珀酸脫氫酶的底物，當有活細胞存在時(shí)，線(xiàn)粒體內琥珀酸脫氫酶可將CCK8直接還原成藍紫色的水溶性Formazan，區別的是MTT需要DMSO來(lái)溶解Formazan，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長(cháng)處測定其吸光度OD值，OD值的高低可間接反映活細胞的數量及其活性。

 

　　交付結果：實(shí)驗數據及分析、實(shí)驗報告、細胞拍照圖片

 

　　質(zhì)量保證：客觀(guān)、公正、可信的實(shí)驗結果

 

　　交付時(shí)間：大約10-20個(gè)工作日（根據實(shí)驗設計等情況決定）

 

　　服務(wù)項目

 

　　服務(wù)流程1、接種細胞：將細胞消化重懸后，用含10％胎牛血清的培養液將細胞稀釋成5-10×105個(gè)/ml。并將細胞接種于96孔板中，每孔100uL。根據實(shí)驗要求平行接種多塊96孔板。

 

　　2、培養細胞/藥物干預：根據實(shí)驗要求，加藥處理。

 

　　3、CCK8檢測：按照實(shí)驗目的，培養一定時(shí)間后，進(jìn)行CCK8檢測，不同的實(shí)驗要求選取的時(shí)間點(diǎn)可能不一樣，具體檢測的時(shí)間點(diǎn)與客戶(hù)協(xié)商處理。

 

　　4、數據處理。

 

　　樣本要求1、客戶(hù)提供生長(cháng)狀況良好的細胞株，同時(shí)提供細胞特性，培養條件及相關(guān)注意事項。

 

　　2、本公司常備DMEM/F-12 1:1、DMEM(H)和RPMI-1640培養基，如細胞需要用其它培養基，則需要客戶(hù)提供培養基。

 

　　3、客戶(hù)提供待檢測的藥物，并指定藥物溶解方式和藥物濃度。另外，需提供藥物的背景信息(包括藥物是否有致病性或致癌性等)。

 

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