明膠酶譜試驗

　　實(shí)驗介紹酶譜法的基本過(guò)程是先將樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1%明膠）電泳分離，然后在有二價(jià)金屬離子存在的緩沖系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性，在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠，最后用考馬斯亮藍將凝膠染色，再脫色，在藍色背景下可出現白色條帶，條帶的強弱與MMP-2和MMP-9活性成正比。

 

　　服務(wù)項目

 

　　服務(wù)流程1、接收樣本。

 

　　2、預實(shí)驗確定樣本中蛋白表達。

 

　　3、正式實(shí)驗，5-10個(gè)工作日內完成，根據樣本類(lèi)型不同、蛋白表達豐度不同以及檢測樣本數量多少相應變化。

 

　　4、出具實(shí)驗報告，提供原始掃描圖片。

 

　　樣本要求可以接收樣本有：提取蛋白樣本、細胞培養上清、組織樣本、血清等其他，樣本來(lái)源為人和大小鼠。

 

　　1、客戶(hù)提供已經(jīng)提取樣本

 

　　1）、蛋白保存完好：蛋白提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　2）、提取過(guò)程中加入合適蛋白酶抑制劑。

 

　　3）、蛋白采用BCA法測濃度后，濃度范圍應該為2-8ug/ul或者更高。

 

　　4）、經(jīng)預實(shí)驗檢測合格后才可進(jìn)行正式實(shí)驗。

 

　　2、客戶(hù)提供細胞上清樣本

 

　　1）、前期實(shí)驗處理細胞狀態(tài)良好并且采取無(wú)血清培養，每個(gè)實(shí)驗組細胞數量保證大于106以上。

 

　　2）、細胞上清1000rpm離心5分鐘后取上清保存于-80℃或者液氮

 

　　3、客戶(hù)提供組織樣本

 

　　1）、組織保存完好：保存于-80℃或者液氮。

 

　　2）、組織重量要求大于100mg，根據蛋白表達豐度不同組織要求質(zhì)量會(huì )相應變化。

 

　　3）、組織中血液殘留少，應該剔除除目的組織以外的部分。

 

　　4、血清：保存于-80℃或者液氮

 

　　5、特殊樣本：非實(shí)驗室常規來(lái)源樣本（狗、豬、猴等）等，根據具體情況制定不同實(shí)驗方案。

 

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