凝膠遷移（EMSA）實(shí)驗

　　實(shí)驗介紹EMSA ( Electrophoretic Mobility Shift Assay ) 凝膠遷移實(shí)驗是一種研究DNA與蛋白質(zhì)或RNA與蛋白質(zhì)相互作用的常用技術(shù)。這項技術(shù)是基于DNA/蛋白質(zhì)或RNA/蛋白質(zhì)復合體在聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）中有不同遷移率的原理。當核轉錄因子與一條人工合成的特異的DNA或RNA結合后，其在PAGE中的遷移率將小于未結合核蛋白轉錄因子的DNA，從而檢測到活化的與DNA或RNA結合的蛋白轉錄或調節因子。EMSA研究順式作用元件與對應轉錄因子的相互作用這個(gè)層次，核心功能是驗證蛋白質(zhì)與特定核酸序列的結合特性，從而間 接推斷已知蛋白質(zhì)的靶序列或已知序列的結合蛋白分子。當檢測如轉錄調控因子一類(lèi)的DNA結合蛋白，可用純化蛋白，部分純化蛋白或核蛋白提取物。在檢測RNA結合蛋白時(shí)，依據目的RNA結合蛋白的位置，可用純化或部分純化的蛋白，也可用細胞核或胞質(zhì)提取物。競爭實(shí)驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特異）和其它非特異片段，來(lái)確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。

 

　　交付結果：完整實(shí)驗報告、實(shí)驗結果圖片

 

　　質(zhì)量保證：客觀(guān)、公正、可信的實(shí)驗結果

 

　　交付時(shí)間：大約10-15個(gè)工作日（根據預實(shí)驗、樣本數量情況決定）

 

　　服務(wù)項目

 

　　服務(wù)流程1、接收樣本、已經(jīng)合成3'末端被Biotin標記的探針、抗體。

 

　　2、預實(shí)驗確定蛋白表達以及探針標記。

 

　　3、正式實(shí)驗。

 

　　4、5-10個(gè)工作日內完成，根據蛋白表達豐度不同以及檢測指標數量多少會(huì )相應變化。

 

　　5、出具實(shí)驗報告，提供原始掃描圖片。

 

　　樣本要求可以接收樣本有：提取蛋白樣本、細胞樣本。

 

　　1、客戶(hù)提供已經(jīng)提取樣本

 

　　1）、蛋白保存完好：蛋白提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　2）、提取過(guò)程中加入合適蛋白酶抑制劑。

 

　　3）、蛋白采用BCA法測濃度后，濃度范圍應該為1-4ug/ul或者更高。

 

　　4）、經(jīng)預實(shí)驗檢測合格后才可進(jìn)行正式實(shí)驗。

 

　　2、客戶(hù)提供細胞樣本

 

　　1）、細胞狀態(tài)良好， 保證運輸到實(shí)驗室的細胞為活細胞。

 

　　2）、每個(gè)實(shí)驗組細胞數量保證大于107以上，根據檢測指標數量多少細胞要求數量會(huì )相應變化。

 

　　3、客戶(hù)提供組織樣本

 

　　1）、建議新鮮組織提取核蛋白。

 

　　2）、組織保存完好：保存于-80℃或者液氮。

 

　　3）、經(jīng)過(guò)凍存組織提取核蛋白效果不理想。根據具體情況提供組織樣本實(shí)驗方案。

 

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