酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（elisa）

　　實(shí)驗介紹酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標準化等優(yōu)點(diǎn)。

 

　　它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

 

　　測量時(shí)，抗原（抗體）先結合在固相載體上，但仍保留其免疫活性，然后加一種抗體（抗原）與酶結合成的偶聯(lián)物（標記物），此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性，當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原（抗體）反應結合后，再加上酶的相應底物，即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原（抗體）含量成比例。 這種有色產(chǎn)物可用分光光度計（酶標儀）加以測定。其方法簡(jiǎn)單，方便迅速，特異性強。

 

　　在收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。建議新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進(jìn)行檢測的標本，及時(shí)儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時(shí)分裝后放在70℃條件下保存，避免反復凍融。

 

　　ELISA可以檢測分泌型蛋白、組織細胞裂解液（胞/核內蛋白）、組蛋白甲基化/磷酸化/乙?；瘷z測等。

 

　　交付結果：實(shí)驗報告、結果的分析

 

　　質(zhì)量保證：客觀(guān)、公正、可信的實(shí)驗結果

 

　　交付時(shí)間：大約10-15個(gè)工作日（根據預實(shí)驗、樣本數量情況決定）

 

　　服務(wù)項目

 

　　服務(wù)流程1、接收樣本以及ELISA試劑盒，實(shí)驗室可以有償提供常備試劑盒或者幫客戶(hù)代購。

 

　　2、預實(shí)驗確定樣本中蛋白表達豐度以及試劑盒效果。

 

　　3、正式實(shí)驗，5-10個(gè)工作日內完成，根據檢測指標數量多少相應變化。

 

　　4、出具實(shí)驗報，數據分析。

 

　　樣本要求可以接收樣本有：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上等；樣本來(lái)源為人和大小鼠。

 

　　1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，2000-3000rpm離心20分鐘左右。仔細收集上清，提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　2、血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后， 2000-3000rpm離心20分鐘左右，提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　3、胸腹水、腦脊液、尿液：用無(wú)菌管收集。2000-3000rpm離心10分鐘左右。提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　4、細胞培養上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。2000-3000rpm離心10分鐘左右，提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　5、培養細胞：每個(gè)實(shí)驗組細胞數量保證大于106以上，細胞狀態(tài)良好， 保證運輸到實(shí)驗室的細胞為活細胞。

 

　　6、組織標本：組織重量要求大于100mg，保存于-80℃或者液氮。

 

　　7、其他：特殊樣本根據具體情況安排實(shí)驗方案。

 

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